組織來源：法氏囊
疾病：淋巴瘤
傳代比列/細(xì)胞消化：1:2傳代
培養(yǎng)條件：DMEM養(yǎng)基;10%胎牛血清;5%雞血清; 0.05mMβ-巰基乙醇; 1%雙抗
介紹：DT40是來自Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到。法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后，建立了DT40細(xì)胞株。 這株細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表達(dá)的c-myc RNA水平較高。它缺少一個正常c-myc基因，但含有兩個拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。這株細(xì)胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。 在IgL位點(diǎn)，DT40包含一個重排和一個胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細(xì)株中都能誘導(dǎo)組織相容性(MHC)II類抗原表達(dá)。v-rel 誘導(dǎo)的MHCII表達(dá)比c-rel誘導(dǎo)快，且其有效性在數(shù)周后達(dá)到c-rel的50倍。這株細(xì)胞呈淋巴母細(xì)胞表型。傳染性檢測表明DT40釋放低水平的傳染性RAV-1。這株細(xì)胞可以用于穩(wěn)轉(zhuǎn)研究。
形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
倍增時間
培養(yǎng)條件
凍存條件
懸浮生長
~48h
氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
凍存液：90%FBS，DMSO 10%,
或使用非程序凍存液
保藏機(jī)構(gòu)
備注ATCC; CRL-2111
該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，請注意離心收集細(xì)胞懸液，請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。
僅限于科學(xué)研究，不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。
產(chǎn)品使用
細(xì)胞接收處理流程：
1：觀察有無破損漏液情況，如有請拍照及時聯(lián)系客服。
2：酒精消毒培養(yǎng)瓶表面后顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)，觀察拍照后不用打開培養(yǎng)瓶蓋 放入培養(yǎng)箱靜
止2-3小時穩(wěn)定 細(xì)胞狀態(tài)。
3：請按照細(xì)胞操作指南進(jìn)行第一次傳代凍存處理。
4：產(chǎn)品隨貨會附帶細(xì)胞說明書、細(xì)胞培養(yǎng)操作指南、細(xì)胞鑒定、支原體檢測報(bào)告。
5：若產(chǎn)品有異常或其他疑問，可隨時聯(lián)系客服;轉(zhuǎn)至技術(shù)支持。
DT40細(xì)胞，雞淋巴瘤細(xì)胞培養(yǎng)方法
常溫細(xì)胞收貨當(dāng)天處理方式
1.收到常溫細(xì)胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 鏡下觀察有無微生物污染現(xiàn)象，拍照記錄不同倍數(shù)鏡下細(xì)胞狀態(tài)和有無染菌現(xiàn)象， 方便后續(xù)售后處理。
3. 消毒后，更換贈送的培養(yǎng)液放置培養(yǎng)箱靜止2-3小時。如細(xì)胞有多數(shù)懸浮細(xì)胞需要離心收集重新接種止培養(yǎng)瓶。
4. 觀察細(xì)胞密度若超過 80%則可正常傳代處理(有的原代細(xì)胞不可傳代，請根據(jù)實(shí)際情況決定)，傳代推薦比例 1：2 到 1：3(按實(shí)際收貨細(xì)胞密度決定，若不確定 可聯(lián)系技術(shù)支持);若細(xì)胞密度不到 80%則可繼續(xù)培養(yǎng)，注意擰松瓶蓋或更換透氣瓶蓋;懸浮細(xì)胞注意離心所有培養(yǎng)基以收集細(xì)胞。
5. 由于氣溫，運(yùn)輸?shù)扔绊懺斐少N壁細(xì)胞漂浮的，請將細(xì)胞離心收集后在離心管中消化后進(jìn)行傳代(參考附件)，或及時聯(lián)系技術(shù)支持進(jìn)行指導(dǎo)傳代。貼壁細(xì)胞傳代：1.從培養(yǎng)容器中吸出用過的細(xì)胞培養(yǎng)基并丟棄;
2.從與貼壁細(xì)胞層相對的容器一側(cè)輕輕加入沖洗液以避免攪動細(xì)胞層，前后搖晃容器數(shù)次
3. 從培養(yǎng)容器中吸出沖洗液并丟棄，向培養(yǎng)瓶中加入預(yù)熱的胰酶;胰酶量應(yīng)足以覆蓋細(xì)胞層(T25為1ml);
4.將培養(yǎng)容器在室溫下孵育約 2分鐘(請注意實(shí)際孵育時間根據(jù)所用細(xì)胞系不同而有所差異);
5.在顯微鏡下觀察細(xì)胞解離情況;如果解離程度未達(dá) 90%，可將孵育時間延長幾分鐘，每 30 秒鐘檢查一次解離情況;
6.細(xì)胞解離程度大于等于 90%時，傾斜培養(yǎng)容器，使細(xì)胞上液體盡快流盡;加入所用解離劑兩倍體積的預(yù)熱生長培養(yǎng)基;吹打細(xì)胞層表面數(shù)次，使培養(yǎng)基分散;
7.將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到15mL 無菌離心管中，以 200×g 的離心力離心 3-5 分鐘(請注意離心速度和時間依細(xì)胞種類不同而有所差異);
8.用最少體積的預(yù)熱生長培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將細(xì)胞懸液按照推薦比例稀釋，并將適量體積的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的細(xì)胞培養(yǎng)容器中，把細(xì)胞放回培養(yǎng)箱(注：如果使用培養(yǎng)瓶，將其放入培養(yǎng)箱前應(yīng)將瓶蓋旋松，以便進(jìn)行充分的氣體交換，除非您使用的是通氣式培養(yǎng)瓶和透氣性瓶蓋)。
懸浮細(xì)胞傳代：將 T25 培養(yǎng)瓶中的懸液收集至離心管中 1000rpm 離心 5min，收集上清，加 1-2ml 培養(yǎng)基重懸，按 1:2 比例進(jìn)行比例傳代分到新T25瓶中，補(bǔ)充5-8ml/瓶新的培養(yǎng)基 ，最后放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
